| Title: |
In-Vitro-Rekonstitution der Deadenylierung und Translationsrepression der nanos-mRNA aus D. melanogaster |
| Authors: |
Pekovic, Filip |
| Contributors: |
Wahle, Elmar; Hüttelmaier, Stefan; Fischer, Utz |
| Publication Year: |
2022 |
| Collection: |
Share it - Open Access und Forschungsdaten-Repositorium der Hochschulbibliotheken in Sachsen-Anhalt |
| Subject Terms: |
ddc:570; ddc:572 |
| Description: |
Die post-transkriptionelle Regulation maternaler mRNAs ist essenziell für die frühe Embryonalentwicklung. So ist die Translationsrepression der nanos-mRNA ent-scheidend für die Ausbildung der anterior-posterior-Achse der Drosophila-Embryonen. Die Repression wird durch Bindung vom Protein Smaug an smaug recognition elements (SREs) in der 3‘-UTR der nanos-mRNA vermittelt, worüber wei-tere Proteine, u.a. der Deadenylasekomplex CCR4-NOT, rekrutiert werden. In dieser Arbeit wurde erstmalig der Drosophila-CCR4-NOT-Komplex und die Smaug-abhängige Deadenylierung in vitro rekonstituiert. Smaug allein ist dabei ausrei-chend, um den CCR4-NOT-Komplex zu rekrutieren und führt dadurch zur Deadeny-lierung von SRE-haltigen RNAs. CCR4-NOT allein verhält sich distributiv, wohin-gegen durch Smaug prozessives Verhalten induziert wird. Außerdem wurde mit zell-freien Translationssystem beobachtet, dass Smaug und Cup für die zeitabhängige und stabile Ausbildung des Translationsrepressorkomplexes notwendig sind. ; Posttranscriptional regulation of maternal mRNAs is essential for early embryonic development. For instance, translational repression of nanos mRNA is critical for the formation of the anterior-posterior axis of the Drosophila embryo. Repression is me-diated through binding of the protein Smaug to smaug recognition elements (SREs) in the 3’ UTR of nanos mRNA. Thereby, additional proteins like the CCR4-NOT deadenylase complex are recruited to the mRNA. Here I report first-time in vitro re-constitution of the Drosophila CCR4-NOT complex and Smaug-dependent dead-enylation. Smaug by itself suffices to cause SRE-specific deadenylation by recruit-ing the CCR4-NOT complex. The CCR4-NOT complex on its own is distributive, whereas in association with Smaug the complex exhibits processive behaviour. Fur-thermore, a cell-free translation system enabled the observation that Smaug and Cup are necessary for the time-dependent and stable formation of the translation repression complex. |
| Document Type: |
doctoral or postdoctoral thesis |
| File Description: |
1 Online-Ressource (169 Seiten); application/pdf |
| Language: |
German |
| ISBN: |
978-1-79603-131-7; 1-79603-131-3 |
| Relation: |
http://dx.doi.org/10.25673/77136 |
| DOI: |
10.25673/77136 |
| Availability: |
https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/79090; https://doi.org/10.25673/77136; https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:gbv:3:4-1981185920-790902 |
| Rights: |
http://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/ |
| Accession Number: |
edsbas.C3028BEB |
| Database: |
BASE |